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正相色譜柱和反相色譜柱的區別

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  • TA的每日心情
    奮斗
    2024-10-8 11:05
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    [LV.5]常住居民I

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    發表于 2024-11-27 12:00:48 | 只看該作者 |倒序瀏覽 |閱讀模式
    正相色譜柱和反相色譜柱在固定相、洗脫順序以及適用樣品等方面存在區別。以下是具體分析:
    1.固定相
    正相色譜柱:通常使用硅膠(Silica)以及其他具有極性官能團如氨基(NH2)、氰基(CN)的鍵合相填料。
    反相色譜柱:常以硅膠為基質,表面鍵合有極性相對較弱的官能團,如C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。
    2.洗脫順序
    正相色譜柱:洗脫順序由弱到強,即極性較弱的組分先被沖洗出色譜柱。
    反相色譜柱:洗脫順序由強到弱,即極性較強的組分先被沖洗出,而極性弱的組分會在色譜柱上有更強的保留。
    3.適用樣品
    正相色譜柱:適用于分離水溶性或極性較大的化合物,如生物堿、苷類、糖類、有機酸等。
    反相色譜柱:主要應用于相對分子質量低于5000,特別是1000以下的非極性小分子物質的分析和純化,如蛋白質、肽、氨基酸、核酸、甾類、脂類、脂肪酸、糖類、植物堿等含有非極性基團的各種物質。
    4.流動相
    正相色譜柱:使用的流動相極性相對比固定相低,如正己烷(Hexane)、二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
    反相色譜柱:所使用的流動相極性較強,通常為水、緩沖液與甲醇、乙腈等的混合物。
    正相色譜柱和反相色譜柱的主要區別在于固定相的極性不同,這導致了它們在洗脫順序、適用樣品和流動相選擇上的差異。正相色譜柱適用于分離極性較大的化合物,而反相色譜柱則更適合分離非極性和弱極性的小分子物質。

    塵世紛擾,吾心浩然。
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  • TA的每日心情
    奮斗
    2024-8-30 16:13
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    發表于 2024-12-6 06:47:03 | 只看該作者
    你的帖子很有邏輯性,條理清晰。
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  • TA的每日心情
    開心
    2024-9-12 11:52
  • 簽到天數: 2 天

    [LV.1]初來乍到

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    發表于 2024-12-6 06:47:03 | 只看該作者
    很有意義的討論,希望能持續下去。
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