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簽到天數: 213 天 [LV.7]常住居民III
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老式分光光度計(也叫分光光度計)是一種用于測量物質吸光度(或透過率)與波長關系的儀器,廣泛應用于化學分析、生物醫學等領域。分光光度計的原理基于比爾定律(Beer-Lambert Law),即物質吸收的光強度與其濃度和光路長度成正比。
老式分光光度計通常由以下主要部分組成:
光源:提供白光,通常使用氘燈、鎢燈等。
單色儀(分光器):將白光分解成不同波長的單色光。
樣品室:放置待測樣品。
光電檢測器:檢測透過樣品的光,并轉化為電信號。
顯示器/讀數裝置:顯示吸光度或透過率的數值。
使用步驟:
1. 準備樣品
液體樣品:通常將樣品放在透明的比色管或光路容器中,確保容器潔凈且無氣泡。
固體樣品:如果是固體,可能需要研磨成粉末或溶解在適當溶劑中,才能進行測量。
2. 打開儀器
打開分光光度計的電源,等待儀器預熱和穩定。
確保光源和單色儀已經正常工作。
3. 選擇波長
老式分光光度計上通常有一個旋鈕或控制按鈕用于設置波長。通過這個控制裝置,選擇你需要測量的波長(單位通常是納米,nm)。
如果不確定最佳波長,可以根據待測物質的吸收光譜選擇最合適的波長。
4. 校準儀器(空白對照)
在測量之前,需要使用“空白對照”來進行校準。空白樣品是指不含待測物質的溶液,通常是溶劑本身(例如水、緩沖液等)。
將空白樣品放入比色管或樣品室,確保光路沒有任何障礙物。
調整儀器,使其顯示0吸光度或100%透過率,這樣儀器就被“歸零”了,準備測量待測樣品。
5. 測量樣品
將待測樣品放入樣品室,確保光路通暢,樣品沒有氣泡。
儀器會測量透過樣品的光的強度,并計算出樣品的吸光度(Absorbance, A)或透過率(Transmittance, T)。
吸光度 (A) 通常是通過儀器顯示,數值越大表示樣品吸光度越強,反之則越弱。
吸光度與透過率之間有關系:
A=?log?T
A=?logT
T=10?A
T=10?A
其中,TT是透過率,AA是吸光度。
6. 讀取結果
儀器會顯示樣品在選定波長下的吸光度值,通常顯示的是一個數字,可能在顯示屏上顯示出來。
對于定量分析,吸光度與樣品濃度是成正比的,可以通過比爾定律進行計算:
A=εcl
A=εcl
其中,AA是吸光度,εε是摩爾吸光系數(物質特性,常常通過文獻查得),cc是樣品濃度,ll是光程(通常為比色管的長度)。
7. 記錄數據
根據吸光度和已知的摩爾吸光系數(如果需要),可以計算樣品的濃度。
將結果記錄下來,并根據需要進行分析。
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