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蒸發光散射檢測器(ELSD)的原理主要基于將柱洗脫液霧化、蒸發,并對不揮發性溶質顆粒進行光散射檢測的過程。以下是其工作原理的詳細解釋: 一、工作原理概述蒸發光散射檢測器通過將色譜柱流出液引入霧化器,與霧化氣體(通常是高純氮氣或空氣)混合后形成均勻分布的微小霧滴。這些霧滴隨后進入加熱的漂移管,在漂移管中溶劑被蒸發,留下微粒或純溶質的小滴。這些溶質顆粒隨后進入光散射檢測池,在激光照射下產生光散射,散射光被光電二極管檢測并轉化為電信號進行記錄和分析。 二、具體工作原理霧化: - 色譜柱流出液在載氣壓力的作用下進入霧化器。
- 在霧化室內,流動相與載氣混合并轉化為細小的液滴,形成氣溶膠。液滴的大小和均勻性對檢測器的靈敏度和重復性至關重要。
蒸發: - 載氣將液滴從霧化室運送到加熱的漂移管中。
- 在漂移管中,溶劑被蒸發掉,留下微粒或純溶質的小滴。蒸發光散射檢測器采用低溫蒸發模式,以維持顆粒的均勻性。
光散射檢測: - 溶質顆粒從漂移管出來后進入光檢測池。
- 在光檢測池中,溶質顆粒被激光照射并產生光散射。
- 散射光通過光電二極管進行檢測,并轉化為電信號進行放大、儲存和顯示。
三、特點與應用特點: - 蒸發光散射檢測器對各種物質具有幾乎相同的響應,不依賴于試樣的光學特性。
- 適用于分析不含發色團、無紫外吸收或紫外末端吸收的試樣。
- 靈敏度相對較低,尤其對于有紫外吸收的組分,其靈敏度比UV檢測約低1個數量級。
- 流動相必須是揮發性的,不能含有緩沖鹽等。
應用: - 蒸發光散射檢測器主要用于檢測揮發性低于流動相的組分,如糖類、高級脂肪酸、磷脂、氨基酸、甘油三酯及甾體等。
- 可用作高效液相色譜(HPLC)、凝膠色譜及超臨界流體色譜的檢測器。
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