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色譜柱的分類與選擇

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    發(fā)表于 2024-8-8 13:23:24 | 只看該作者 |倒序瀏覽 |閱讀模式
    色譜柱的分類可以從多個維度進行,主要包括以下幾個方面:  
    1、按柱管材質(zhì)和粗細分類:  
    填充色譜柱:這類色譜柱多用內(nèi)徑46mm的不銹鋼管制成螺旋形柱管,常用柱長24m。它們填充有液體固定相(氣-液色譜)或固體固定相(氣-固色譜)。  
    毛細管色譜柱:毛細管色譜柱的柱管為毛細管,常用內(nèi)徑0.1~0.5mm的玻璃或彈性石英毛細管,柱長可達幾十米至百米。毛細管色譜柱按填充方式可分為開管毛細柱及填充毛細柱。  
    2、按分離機制分類:  
    分配柱:利用固定液(高沸點液體)涂漬在載體上構(gòu)成的液體固定相,通過組分的分配系數(shù)差別實現(xiàn)分離。化學鍵合相是其中的一種特殊形式,具有不流失的優(yōu)點。  
    吸附柱:將吸附劑裝入色譜柱構(gòu)成,利用組分的吸附系數(shù)差別進行分離。固體固定相還包括分子篩與高分子多孔小球等。  
    3、按色譜類型分類:  
    液相色譜柱:將樣品帶載液體注入柱內(nèi),利用溶液對樣品中各化合物成分的親和力差別進行分離。液相色譜柱按分離模式可分為正相、反相、離子交換等色譜柱。  
    氣相色譜柱:將樣品帶載氣體注入柱內(nèi),利用氣體與目標化合物在柱內(nèi)的相互作用原理進行分離。  
    4、按用途分類:  
    常規(guī)分析柱:適用于一般分析需求。  
    窄徑柱:內(nèi)徑較小,靈敏度較高,適用于需要高靈敏度的分析。  
    毛細管柱:具有極高的分離能力,常用于復(fù)雜混合物的分析。  
    制備柱:包括半制備柱、實驗室制備柱和生產(chǎn)制備柱,用于樣品的制備和純化。  
    色譜柱的選擇:  
    1、分析物的性質(zhì):  
    分子量:大分子樣品一般應(yīng)選擇較大孔徑的色譜柱,如蛋白質(zhì)、多肽類。  
    極性:非極性和極性較弱的化合物常選擇直鏈烷烴(如C18)固定相色譜柱;極性較強的化合物則可能需要選擇如CN柱或氨基柱等。  
    官能團:特定官能團的存在可能影響色譜柱的選擇,如含苯環(huán)的芳香族化合物在苯基柱上具有較高的選擇性。  
    2、色譜柱的尺寸:  
    柱長:較長的色譜柱組分保留較強,運行時間較長,柱效更高,分離度效果更好。但應(yīng)綜合衡量運行時間和柱效,選擇長度適宜的色譜柱。  
    內(nèi)徑:內(nèi)徑小的色譜柱靈敏度較高,峰型更窄,但載樣量較小。應(yīng)根據(jù)實際需求在靈敏度和載樣量之間綜合衡量。  
    填料粒徑:粒徑小的色譜柱分離度較好,但色譜柱壓力更大。應(yīng)根據(jù)分離需求選擇合適的粒徑。  
    3、色譜柱的填料:  
    材質(zhì):不同材質(zhì)的填料具有不同的物理化學性質(zhì),如硅膠、氧化鋁、聚合物等。  
    孔徑:大孔徑的填料可以延長大分子在填料中的滯留時間,達到充分分離。  
    比表面積:高比表面積具有較強的保留能力、柱容量和分離度,但達到平衡狀態(tài)的時間較長。  
    4、流動相的組成:  
    流動相的溶劑、添加劑和pH值等都會影響色譜柱的分離效果。應(yīng)根據(jù)分析物的性質(zhì)選擇合適的流動相。  
    5、色譜柱的使用溫度和壓力:  
    柱溫和流速等條件也會影響色譜柱的分離效果。應(yīng)根據(jù)實驗條件進行優(yōu)化。

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    發(fā)表于 2024-8-26 13:23:46 | 只看該作者
    嗯嗯,學到了,以后試試這個方法。
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    發(fā)表于 2024-8-26 13:33:27 | 只看該作者
    還有超臨界流體色譜柱(SFC),使用超臨界流體作為流動相,適用于難以用傳統(tǒng)色譜分離的物質(zhì)。
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