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沒有厭氧培養(yǎng)箱怎么進(jìn)行厭氧培養(yǎng)?

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發(fā)表于 2025-7-3 13:51:29 | 只看該作者 |倒序瀏覽 |閱讀模式
如果沒有厭氧培養(yǎng)箱,可以采用以下幾種替代方法進(jìn)行厭氧培養(yǎng):
一、厭氧罐法
原理:利用鈀催化劑催化氫氣和氧氣反應(yīng)生成水,配合產(chǎn)氣袋釋放氫氣和二氧化碳。
操作步驟:
將接種后的培養(yǎng)基放入?yún)捬豕蕖?br /> 加入產(chǎn)氣袋(含硼氫化鈉、碳酸氫鈉等),注入少量水觸發(fā)產(chǎn)氣。
密封罐體,37℃培養(yǎng)24-48小時。
優(yōu)點(diǎn):操作簡便,成本低,適用于常規(guī)厭氧菌(如梭菌屬)。
二、真空置換法
原理:通過抽真空后充入無氧混合氣體(如N?:CO?:H?=85:10:5),重復(fù)3-4次置換罐內(nèi)氣體。
適用場景:實驗室中需快速建立低氧環(huán)境的小規(guī)模培養(yǎng)。
三、Hungate滾管技術(shù)
原理:培養(yǎng)基煮沸除氧后持續(xù)通入無氧氣體(N?/CO?),使用預(yù)還原的厭氧試管,以注射器分裝并快速密封,通過滾管機(jī)旋轉(zhuǎn)使培養(yǎng)基均勻凝固成薄層。
應(yīng)用:嚴(yán)格厭氧菌(如產(chǎn)甲烷古菌)的分離與純培養(yǎng)。
四、焦性沒食子酸法
原理:焦性沒食子酸在堿性條件下與氧氣反應(yīng)生成焦性沒食子橙。
操作步驟:
在培養(yǎng)皿蓋內(nèi)放置焦性沒食子酸粉末和碳酸氫鈉(質(zhì)量比1:10)。
滴加少量水后迅速密封培養(yǎng)皿,靜置培養(yǎng)。
局限:僅適合短時培養(yǎng)(<24小時),氧氣吸收量有限。
五、硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基法
原理:培養(yǎng)基中添加硫乙醇酸鈉(0.05%-0.1%),通過巰基(-SH)維持低氧化還原電位。
特點(diǎn):適用于兼性厭氧菌(如大腸桿菌)的梯度氧培養(yǎng),液體培養(yǎng)基中可形成氧濃度梯度。
六、刃天青指示劑法
原理:添加刃天青(Resazurin,0.0001%),通過顏色變化(無色→粉紅)實時監(jiān)測氧氣殘留。
七、共培養(yǎng)法
原理:將需氧菌(如枯草芽孢桿菌)與目標(biāo)厭氧菌共培養(yǎng),利用前者快速消耗氧氣。
應(yīng)用:模擬自然共生環(huán)境,研究微生物互作。
八、厭氧手套箱
原理:預(yù)抽真空后充入混合氣體,循環(huán)凈化至氧含量<5 ppm。
操作流程:
通過空氣鎖傳遞樣品,箱內(nèi)完成接種、觀察等操作。
優(yōu)勢:可長期維持無氧環(huán)境,適合嚴(yán)格厭氧菌(如擬桿菌屬)的高通量實驗。
九、改良燭缸法
原理:通過燃燒白蠟燭在燭缸系統(tǒng)中產(chǎn)生4-5%的二氧化碳,并瞬間降低密封缸內(nèi)的氧氣水平。
優(yōu)點(diǎn):是一種敏感且成本效益高的替代方法,適用于資源有限的環(huán)境。
十、硅膠管替代培養(yǎng)法
原理:使用硅膠管替代傳統(tǒng)方法,更有效地研究土壤甲烷循環(huán)。
十一、玻璃瓶密封法
原理:將商業(yè)MRS培養(yǎng)基加入玻璃瓶中,通入二氧化碳?xì)怏w后密封,用于乳酸菌的分離。
優(yōu)點(diǎn):簡單可行,適用于乳酸菌的分離。
這些方法可以根據(jù)實驗的具體需求和條件選擇使用,以實現(xiàn)厭氧培養(yǎng)的目的。

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發(fā)表于 2025-10-22 01:47:30 | 只看該作者
漲知識了,感謝分享!
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板凳
發(fā)表于 2025-12-1 12:16:58 | 只看該作者
樓上的分析很有道理,讓我對這個問題有了新的認(rèn)識。
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  • TA的每日心情
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    2024-7-30 13:20
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    發(fā)表于 3 天前 | 只看該作者
    樓主的經(jīng)驗很寶貴,謝謝分享。
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  • TA的每日心情

    2024-8-5 17:37
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    發(fā)表于 3 天前 | 只看該作者
    這個觀點(diǎn)很有深度,值得思考。
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