凝膠滲透色譜儀的使用方法

潮光閣

使用凝膠滲透色譜儀的基本步驟和操作流程如下：
1、準備工作
樣品準備
選擇合適溶劑：根據樣品的特性和分析需求，選擇合適的溶劑作為流動相。常見的流動相有四氫呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜等有機溶劑，對于水溶性聚合物可選用水相或水與有機溶劑的混合液。確保溶劑的純度和質量，避免含有雜質影響測試結果。
樣品溶解：將適量的樣品溶解在選定的溶劑中，制成濃度適宜的溶液。一般來說，樣品濃度在2-5毫克/毫升之間較為合適，具體濃度可根據樣品的實際情況和儀器的靈敏度進行調整。對于不易溶解的樣品，可以采取加熱、攪拌等方法促進溶解，但要注意避免樣品發生分解或降解。
過濾樣品：使用合適的濾膜對樣品溶液進行過濾，以去除其中的不溶性雜質和顆粒，防止其堵塞色譜柱。對于有機相樣品，通常使用0.45微米的濾膜；對于水相樣品，則使用0.22微米的濾膜。
儀器準備
開機預熱：打開凝膠滲透色譜儀的電源開關，啟動儀器，讓儀器預熱一段時間，一般至少需要30分鐘到1小時，以確保儀器的穩定性和各部件達到正常工作溫度。
檢查系統連接：檢查儀器的各個部件之間的連接是否牢固，包括泵、進樣器、色譜柱、檢測器和數據采集系統等，確保沒有漏液現象。同時，檢查流動相的供應是否正常，廢液排放是否通暢。
清洗系統：用流動相沖洗整個系統，排除管路和色譜柱中的空氣和雜質，直到檢測器的基線平穩，無異常峰出現。
2、參數設置
設定流動相流速：根據色譜柱的要求和分析需求，設置合適的流動相流速。較高的流速可以縮短分析時間，但可能會降低分離效果；較低的流速則可以提高分離效果，但分析時間會延長。一般來說，流速控制在0.1-1毫升/分鐘之間。
設置柱溫：根據樣品的性質和分析要求，設置色譜柱的溫度。柱溫的變化會影響樣品在色譜柱中的分離效果和保留時間，因此需要保持柱溫的穩定。有些儀器配備了柱溫控制系統，可以在常溫至高溫范圍內進行精確控制。
選擇檢測器參數：根據所使用的檢測器類型（如示差折光檢測器、紫外檢測器等），設置相應的檢測器參數，如檢測波長、靈敏度等，以獲得最佳的檢測信號。
3、樣品測定
進樣：使用進樣器將過濾后的樣品溶液注入到色譜柱中。進樣量要適中，一般為幾十微升到幾百微升不等，具體進樣量可根據樣品的濃度和色譜柱的規格進行調整。注意進樣時要快速、準確，避免產生氣泡或漏液現象。
開始采集數據：啟動數據采集系統，記錄樣品在色譜柱中的分離過程和檢測信號。在樣品通過色譜柱的過程中，不同分子量的高分子化合物會按照分子大小的順序依次從色譜柱中流出，檢測器會根據樣品的濃度變化產生相應的信號，形成色譜圖。
結束測定：當樣品完全通過色譜柱，且檢測信號回到基線后，停止數據采集，完成一次樣品的測定。
4、數據處理與分析
分子量校正：使用已知分子量的高分子標準物質制作標準曲線，通過對標準物質的測定，建立分子量與保留時間或淋出體積之間的關系。然后根據樣品的保留時間和標準曲線，計算出樣品中高分子化合物的分子量分布。
數據分析：對采集到的色譜圖進行處理和分析，可以得到樣品的分子量分布曲線、平均分子量、分子量分散度等信息。還可以根據需要進行進一步的數據處理和統計分析，如比較不同樣品之間的差異、研究分子結構與性能的關系等。

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