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標題: 分光光度計測定吸光度詳解 [打印本頁]

作者: 朗訊光測量技術(shù) 時間: 2024-10-31 13:23
標題: 分光光度計測定吸光度詳解
分光光度計是一種重要的光學分析儀器，它利用物質(zhì)對不同波長光的吸收特性來定量分析溶液中各種溶質(zhì)的濃度。吸光度（Absorbance,A），作為核心指標，直接反映了物質(zhì)對特定波長光的吸收程度，是分光光度法定量分析的關(guān)鍵參數(shù)。下面我們詳細介紹如何使用分光光度計測量吸光度：

實驗準備
1.選擇波長：基于物質(zhì)的最大吸收波長（λ_max），這是根據(jù)物質(zhì)的光譜圖確定的，保證最高測量靈敏度。
2.配制標準溶液：準備一系列已知濃度的待測物質(zhì)溶液，用作構(gòu)建標準曲線。
3.準備空白參比：選擇合適溶劑作為參比，去除背景吸收，純凈的溶劑通常是**。

操作步驟
1.開機預熱：啟動分光光度計，并進行至少30分鐘預熱，確保光源穩(wěn)定。
2.設(shè)置參數(shù)：在儀器上選擇所需波長，調(diào)整其他必要參數(shù)，如帶寬、數(shù)據(jù)輸出格式等。
3.調(diào)零：使用空白參比進行調(diào)零，確保讀數(shù)基線處于零點。
4.測量標準溶液：依次測量各個濃度的標準溶液，記錄吸光度值。
5.繪制標準曲線：以濃度為橫軸，吸光度為縱軸，制作標準曲線，建立濃度與吸光度之間的線性關(guān)系。
6.測量未知樣：最后，測量未知樣品的吸光度，通過標準曲線反推其濃度。

注意事項
1.比色皿清潔：確保比色皿內(nèi)部干凈、無劃痕，外部擦拭干燥，避免氣泡存在。
2.操作規(guī)范：比色皿插入儀器時需垂直對準，避免晃動，確保每次測量一致。
3.避免過飽和：確保溶液不超過比色皿最大容量，防止溢出或污染儀器內(nèi)部。
4.及時記錄：每一步操作都應(yīng)及時記錄，包括波長、溫度、使用的試劑信息，便于后期復核。

吸光度測量的準確性直接影響到最終的分析結(jié)果，因此，在實驗中嚴格遵守操作規(guī)程，合理設(shè)置實驗條件，是確保數(shù)據(jù)可靠性的前提。此外，熟練掌握儀器使用技巧，定期進行儀器校準和維護，也是提升測量精度不可忽視的因素。

作者: zhouyiq 時間: 2024-11-1 19:17
同意樓上的看法，一起支持！

作者: 王權(quán)貧困 時間: 2024-11-21 15:08
說得很在理，我會借鑒你的觀點。

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